1.無菌室應設有無菌操作間和緩沖間，無菌操作間潔凈度應達到10000級，室內溫度保持在18-24℃，濕度保持在45-65%。超凈臺潔凈度應達到100級。
2.無菌室應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防污染。
3.嚴防一切器材和培養基污染，已污染者應停止使用。
4.無菌室應備有工作濃度的液，如5%的甲酚溶液，75%的酒精，0.1%的新潔爾滅溶液，等等。
無菌室應定期用適宜的液清潔，以保證無菌室的潔凈度符合要求。
需要帶入無菌室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應包扎嚴密，并應經過適宜的方法。
工作人員進入無菌室前，必須用肥皂或液洗手，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進入無菌室進行操作。
定期檢查室內空氣無菌狀況，數應控制在10個以下，發現不符合要求時，應立即徹底。/無菌室無菌程度的測定方法：取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養基平板各3個（平板直徑均9厘米），置無菌室各工作位置上，開蓋曝露半小時，然后倒置進行培養，測總數應置37℃溫箱培養48小時；測霉菌數則應置27℃溫箱培養5天。`霉菌總數均不得超過10個為 。
準備工作
1． 先進行無菌室空間的，開啟紫外燈30—60分鐘
2． 檢驗用的有關器材， 搬入無菌室前必須分別進會
3． 操作人員必須將手清洗，穿戴好無菌工作衣、帽和鞋，才能進入無菌室
4． 進入無菌室后再一次手部，然后才進行檢驗操作
